液質采購之七:液質聯用儀離子源的選擇
液相色譜質譜聯用儀,簡稱液質聯用儀(LC/MS或LC/MS/MS),常用離子源從大的分類來說,主要有大氣壓離子源(以下簡稱API)、基質輔助激光解析電離源(以下簡稱MALDI)和快原子轟擊源(以下簡稱FAB)三種電離方式。目前實驗室常用的大氣壓電噴霧電離ESI、大氣壓化學電離APCI、基質輔助激光解析電離源(MALDI)。
1.大氣壓離子源(API)
(包括大氣壓電噴霧電離ESI、大氣壓化學電離APCI、大氣壓光電離APPI)
ESI的優點:
可生成高度帶電的離子而不發生碎裂,這樣可將質荷比降低到各種不同類型的質量分析儀都能檢測的程度。通過檢測帶電狀態,可計算離子的真實分子量。同時,解析分子離子的同位素峰也可確定帶電數和分子量,因同位素峰間的質荷比差與帶電數相對應。大優勢是可方便地與分離技術聯用。
ESI的缺點:
ESI的主要缺點是它只能接受非常小的液體流量(1-10μl/min),這一缺點已被1987年研制出來的離子噴霧接口(ISP)所克服(離子噴霧接口是一種借助氣動的電噴霧接口,它可適應較高的流速)。
APCI&APPI的優點:
適用于低極性化合物離子化;寬度動態范圍(4-5個數量級);質量敏感,可耐受高緩沖液濃度
APCI&APPI的缺點:
化合物熱穩定性低(高130-150℃),易揮發,需要摻雜劑
2.基質輔助激光解析電離源(MALDI)
在一個微小的區域內,在極短的時間間隔 (ns數量級 )中,激光對靶上待分析物質提供高強度脈沖式能量,使其在瞬間完成解吸和電離,且不產生熱分解。MALDI是一種直接氣化并離子化非揮發性樣品的質譜離子化方式,但是其離子化機理尚不清楚,存在兩種可能性:離子在固態時已形成,激光照射時只是簡單的釋出;或是由激光引發的離子 -分子反應產生的。
MALDI的優點:
可電離一些較難電離的樣品 (特別是生物大分子 ) ,得到完整的電離產物,且無明顯碎片;單電荷分子離子峰占多數,質譜圖較簡單,適合多組分樣品的分析;適用范圍廣,能耐受一定程度的鹽和緩沖液;對樣品處理的要求不嚴格,甚至可以直接分析未處理過的生物樣品,從而簡化繁瑣的制樣過程;靈敏度高。
MALDI的缺點:
然而在有機小分子、煙草煙氣化學成分定性定量分析方面則應用較少。
2.快原子轟擊源(FAB)
用加速的中性原子(快原子)撞擊以甘油(底物)調和后涂在金屬表面的有機化合物(“靶面”),導致這些有機化合物電離的方法稱之為快原子轟擊(FAB)。以電子轟擊氣壓約為100Pa的中性氣體(氬或氦),產生的惰性氣體離子經聚焦和加速后撞擊靶面導致分析物的離子化稱作離子轟擊作用。在此基礎上將氬離子還原為中性原子,再以加速的中性原子撞擊“靶面”即為快原子轟擊。分析物經中性原子的撞擊獲取足夠的動能以離子或中性分子的形式由靶面逸出,進入氣相。產生的離子一般是準分子離子。
FAB的優點:
對熱不穩定、難以汽化的化合物的分析有獨到的長處。尤其是它對肽類和蛋白質分析的有效性,在電噴霧接口出現前是其他接口無法相比的。FAB在肽類和蛋白質分析方面有大量的報道和成功的蛋白質分析實例,顯示出在此領域內很強的實用性。
FAB的缺點:
只能在低流量下工作(<5μl/min),嚴重限制了液相柱的分離效果。流動相中含有的1%-5%的甘油會使離子源很快變臟。液體通過石英毛細管時容易造成堵塞。此外,由于它的特殊的制樣方法,FAB的一個很大的問題是混合物樣品中共存物質的干擾,它們常常會抑制分析物的離子化,造成靈敏度下降甚至根本沒有信號產生。
隨著質譜技術不斷發展,質譜種類越來越多,高選擇性、高靈敏度、高通量質譜不斷出現,在離子源技術也出現了原位直接進樣即真正實現直接、快速、無損、無接觸分析。還有液體萃取表面分析技術作為新型的質譜進樣系統,高通量分析復雜的生物基質樣品,通過成像技術和數碼控制,定位樣品采樣點,用一滴溶劑對樣品或組織進行表面微萃取,萃取液經由基于芯片的納升電噴霧離子化,進行串聯質譜或高分辨質譜分析。以及成像技術的離子源。
新離子源推薦:原位直接進樣,與液質廠家質譜兼容性高
(快速、綠色、無接觸分析藥品)
國際知名的學術研究機構如 Purdue、Rice、Harvard、UC Davis、北大、浙大、NIH、中科院、中醫藥大學等運用 DART 質譜做出了許多先進的發明和發現。近兩年,DART 在臨床診斷及檢驗等領域也獲得了突破性的進展,美國佐治亞州的卵巢癌研究中心等使用 DART 質譜法準確識別惡性卵巢癌患者和良性患者及健康人的血清代謝譜,用于卵巢癌癥的輔助診斷,準確率達99%至100%。中國食品藥品檢定研究院(sFDA)、中國檢驗檢疫科學研究院、北京市藥檢所、中國計量院、藥科大學、北京大學、出入境檢驗檢疫等國內學術機構和藥品、食品檢驗檢測機構也陸續采納了 DART 技術,運用在藥品、食品、材料、化妝品、保健品等質量安全檢驗和檢測分析及高新技術產業化研究。
新離子源推薦之二:多通道納噴離子源,液體萃取表面分析,與液質廠家質譜兼容性高
“多通道納噴離子源 - 質譜系統”是集液相色譜(LC)、質譜(MS)、芯片納升注射、餾分收集和液體萃取表面分析等優勢于一身的新穎的高端質譜產品。不同于傳統的單一模式的液質聯用分析,LESA 液體萃取表面分析作為新型的質譜進樣系統,更適用于通量分析復雜的生物基質樣品,能充分發揮高端質譜儀尤其是高分辨質譜和串聯質譜的強大功能,既可以在有限的時間內提高樣品分析通量和重現性,又可以在充裕的時間內詮析復雜樣品,發掘生物基質中更加豐富的化學和生物學信息。
新離子源推薦之三:質譜成像,用于多肽、蛋白質、核酸等生物大分子、有機小分子和人工合成高聚物分析的AP-MALDI大氣壓基質輔助激光解吸電離源
采用高效的固態激光器,使離子化更加連續穩定。調諧優化簡便,可質譜成像,高成像分辨率達5μm。與各種質譜分析器相聯,適于多肽、蛋白質、核酸、唾液酸神經節苷酯、低聚木糖、表面活性劑、聚合物等大分子以及氨基酸、寡肽、中性寡糖等小分子化合物的原位、直接分析,與液質廠家質譜兼容性高。
AP-MALDI的兼容性也遠遠好于真空MALDI,與各個廠家多種類型的質譜儀(串四極桿、離子阱、TOF、QTOF、Orbitrap、FT等等)兼容,并能實現與原有離子源地快速互換。
圖片和內容部分來自網絡網站和綠綿科技留存資料
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